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一套成像系统,既能提供大型样品的光学切片,又几乎无光毒性或光漂白性,同时还有极高的时间分辨率。
蔡司 Lightsheet Z.1 恰恰能实现这一切。独一无二的多视角激光片层扫描显微成像系统(Light Sheet Microscopy)能够记录大型活体样品的发育过程,对样品低损伤地成像,提供更多的信息。
成像速度极快:Lightsheet Z.1 是一款能以极快速度获取光学切片的显微工具,可让您以亚细胞分辨率获得完整的样品图像,耗时却远少于采用其它技术所需的时间。
组织透明处理技术能够让您深入大型生物样品内,例如:组织切片、大脑、胚胎、器官球状体或活组织切片。您可以使用增强的光学穿透深度来捕获整个器官的荧光信号。这也令其成为一项具有发展前景的技术,例如:检测小鼠大脑神经元网络。
Lightsheet Z.1 结合了光透技术与激光片层扫描显微技术两者的优势。它允许您借助出色的光效能和速度对经组织透明液处理的大型样品成像,无任何光毒性。您现在可以利用数千幅高质量图像来获取多区块 Z 轴层叠图像。成像速度通常为每秒 10 至 40 帧,成像时间从数小时缩短至数分钟。
使用配有 LD Plan-Apochromat 20x/1.0 物镜的 Lightsheet Z.1 显微镜,在经折射率 n=1.38 的 Scale 介质(Hama 等,Nat Neurosci 期刊,2011 年)进行透明处理的组织上来完成实验。如果水性澄清介质的折射率为 n=1.45,那么您可以选择 Lightsheet Z.1 成像物镜 20x/1.0(选用 CelExplorer Labs 公司生产的 FocusClear™ 澄清液(Chung 等,Nature 期刊,2013 年)处理最佳,http://www.celexplorer.com) 或 Lightsheet Z.1 成像物镜 5x/0.16 检测样品。
样品夹配有易于使用的接口,能灵活地调整样品摆放,以满足您的特定需求。各种不同的适配器能帮助您从底部或采用顶部悬挂的方式来放置样品:自由选择最佳观察角度。
Lightsheet Z.1 是观察活体样品发育的一种对样品损伤最低的方法,它开启了研究新纪元。
以下为激光片层扫描显微技术(Light Sheet Fluorescence Microscopy)的应用:
在斑马鱼和黑腹果蝇等模式生物胚胎形成阶段,对细胞进行时间、空间模式的荧光成像。
胚胎与小型生物中细胞动态过程的快速成像,例如:细胞迁移、心脏发育、血流、血管发育、神经发育及钙成像。
三维细胞培养、球体和囊肿、组织培养、器官培养的实时成像。如细胞迁移、表达模式及细胞增殖的分析。
对荧光标记的固定样品(组织切片、小鼠大脑、胚胎、器官、球状体和活组织切片)成像,采用折射率 n=1.38 或 n= 1.45 的水性透明介质对样品进行光透处理。选用 Scale A2,n=1.38,(Hama 等,Nat Neurosci 期刊,2011 年)或 FocusClear™ (CelExplorer Labs 公司,http://www.celexplorer.com)澄清液,n=1.45(Chung 等,Nature 期刊,2013 年)处理最佳。
观察敏感的发育过程和执行生理测量。
使用 Lightsheet Z.1 对海洋生物进行荧光成像,例如:海鞘、鱿鱼、浮游生物及扁形虫。
固定和活体样品的精细三维结构成像,例如:斑马鱼和青鳉鱼。
激光片层扫描显微技术 LSFM 将荧光激发与检测分割成两个独立的光路,检测轴线与光照轴线垂直。也就是说,您可以对样品内部的单一层面实现照明,通过只激发这一层面的荧光,产生内源性的光学切片。不需要针孔或者特殊的图像处理。
来自于焦平面的荧光通过 CCD 成像,而不是像共聚焦或者其它激光扫描显微镜一样,通过激光扫描逐点成像。与其它显微镜技术相比,基于 CCD 检测器的并行图像采集更快速,且所需的激发光强更小。
总而言之,LSFM 将光学切面效果与焦平面图像的并行采集两者结合。令三维成像极其快速,且大大提高了光效率。
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